اسپیکٹروفمو میٹر جدید آلوکولوجی حیاتیات لیبارٹریوں میں معمول کے آلات بن گئے ہیں. عام طور پر نیوکلیک ایسڈ، پروٹین کی مقدار میں مقدار اور بیکٹیریل کی ترقی کی سنجیدگی کی مقدار کی مقدار میں استعمال کیا جاتا ہے.
اسپیکٹروفوٹومیٹر کے سادہ اصول
سپیکٹروفوتومیٹر ایک روشنی ذریعہ کا استعمال کرتا ہے جو ایک سے زیادہ طول و عرض پیدا کرسکتا ہے، اور سپیکٹروکوک آلات کی ایک سلسلہ کے ذریعہ گزر جاتا ہے جس میں ایک مخصوص طول موج کی روشنی کا ذریعہ پیدا ہوتا ہے. روشنی ماخذ ٹیسٹ کے نمونے کے ذریعے گزرنے کے بعد، روشنی کے ذریعہ کا حصہ جذب کیا جاتا ہے، اور نمونہ کے نمونے کا حساب کیا جاتا ہے، اس طرح نمونہ حراست میں بدل جاتا ہے. . نمونے کے جذب نمونے کی حراست میں متغیر ہے.
نیوکلیکل ایسڈ کی مقدار
نیوکلیک ایسڈ کی مقدار میں سپیکٹروفوٹومیٹر کا سب سے زیادہ استعمال کردہ فعل ہے. Oligonucleotides، سنگل پھنسے ہوئے، ڈبل پھنسے ہوئے ڈی این اے، اور آر این اے کو ایک بفر میں مقدار میں رکھا جا سکتا ہے. نیوکلیک ایسڈ کی سب سے زیادہ جذب چوٹی کی جذب چوٹی 260 ملی میٹر ہے. ہر نیوکلیک ایسڈ کی انوولک ساخت مختلف ہے، لہذا تبادلوں کے عوامل مختلف ہیں. نیوکلیسی ایسڈ کی مختلف قسموں کو کم کرنے کے لئے، پیشگی میں متعلقہ جزو منتخب کریں. مثال کے طور پر، 1 او ڈی کی جذب ڈی ایس ڈی اے اے کے 50 μg / ملی لیٹر، 37 μg / ملی ایس ایس ڈی اے اے، 40 μg / آر این اے ملی میٹر اور اوک کی 30 μg / ملی ایل. ٹیسٹ کے بعد جذب اسی نمونے کی حراستی کو حاصل کرنے کے لئے مندرجہ بالا درجے کی طرف سے تبدیل کر دیا جاتا ہے. جانچ کرنے سے پہلے، صحیح طریقہ کار کا انتخاب کریں، اسٹاک حل اور سستے کی حجم درج کریں، اور پھر خالی اور نمونے کا حل آزمائیں. تاہم، تجربہ ہمیشہ ہموار نہیں تھا. تجرباتی مرکز کے لئے غیر مستحکم پڑھنے کا سب سے بڑا سر درد ہو سکتا ہے. اعلی سنویدنشیلتا کے ساتھ سازوسامان جذب میں زیادہ سے زیادہ بہاؤ دکھاتا ہے.
اصل میں، سپیکٹروفوتامیٹر کے ڈیزائن اصول اور کام کرنے والے اصول کو جذباتی طور پر کسی مخصوص رینج کے اندر اندر مختلف ہوتی ہے، یہ ہے کہ یہ آلہ کچھ درست اور صحت مند ہے. مثال کے طور پر، Eppendorf Biophotometer کی درستگی ≤1.0٪ (1A) ہے. اس طرح کے ایک سے زیادہ ٹیسٹ کے نتائج کے تقریبا 1.0٪ کے درمیان مختلف ہوتی ہیں اور عام ہیں. اس کے علاوہ، نکلیک ایسڈ خود اور بفر کے پی ایچ جی جس میں نیچک ایسڈ تحلیل، آئن حراستی، وغیرہ وغیرہ کے فزیککیمیٹک خصوصیات پر غور کرنے کے لئے بھی ضروری ہے. جب آئن کی حراستی کی جانچ کے دوران بہت زیادہ ہے، تبدیلیوں کو پڑھنا، لہذا یہ ایک مخصوص پی ایچ او کی قدر اور کم آئن حراستی کا استعمال کرنے کی سفارش کی جاتی ہے. بی بی کے طور پر بفر، ریڈنگ کو بہت مستحکم کرتے ہیں. نمونہ کی ڈھل حراستی بھی ایک عنصر ہے جو نظر انداز نہیں کیا جاسکتا ہے: نمونے میں خاص طور پر نکلیک ایسڈ نمونوں کے کچھ ٹھیک ذرات کی ناگزیر موجودگی کی وجہ سے. ان چھوٹے ذرات کی موجودگی ٹیسٹ کے نتائج کے ساتھ مداخلت کرتی ہے. ٹیسٹ کے نتائج پر ذرات کے اثر کو کم کرنے کے لئے، نکلیک ایسڈ کی جذب کم از کم 0.1 A سے زیادہ ہونے کی ضرورت ہوتی ہے، اور جذب ترجیحات 0.1 اور 1.5 کے درمیان ہے. اس حد کے اندر اندر، اس کی مداخلت ذرات نسبتا چھوٹے ہیں اور نتیجہ مستحکم ہے.
اس کا مطلب یہ ہے کہ نمونہ کی حراست میں بہت کم یا بہت زیادہ نہیں ہونا چاہئے (فوٹو گرافی کے ٹیسٹ کی حد سے باہر). آخر میں، اختلاط کے طور پر آپریٹنگ عوامل کافی ہونا چاہئے، دوسری صورت میں جذباتی قیمت بہت کم ہے، یہاں تک کہ منفی اقدار بھی؛ مرکب بلبلوں میں موجود نہیں ہوسکتا ہے، خالی مائع میں کوئی معطل معاملہ نہیں ہے، دوسری صورت میں پڑھنا کافی تیز ہے؛ خالی اور نمونہ کی جانچ کرنے کے لئے ایک ہی cuvette استعمال کیا جانا چاہئے ورنہ، حراستی میں فرق بہت بڑا ہے؛ تبادلوں کا عنصر اور نمونہ حراستی یونٹ مستقل طور پر منتخب کیا جاتا ہے؛ ونڈو پہننے والے کویوٹ استعمال نہیں کیا جا سکتا؛ نمونہ کے حجم کویوٹ کے ذریعہ کم از کم حجم تک پہنچنا ضروری ہے.
نیوکلیڈ ایسڈ حراستی کے علاوہ، سپیکٹروفیٹومیٹر بھی نمونے کی پاکیزگی کا اشارہ کرتے ہیں، جیسے نمونے کی پاکیزگی کا تعین کرنے کے لئے استعمال کیا جاتا ہے، ایک نمونے کی پاکیزگی، جیسے 260 / A 280 کے تناسب کا اشارہ بھی بہت اہم اشارہ ظاہر کرتا ہے. 280 این ایم. 1.8 (ڈی این اے) یا 2.0 (آر این اے) سے زیادہ تناسب کے ساتھ خالص نمونہ. اگر تناسب 1.8 یا 2.0 سے کم ہے، تو یہ پروٹین یا فینولک مادہ کی موجودگی کی نشاندہی کرتا ہے. A 230 سے پتہ چلتا ہے کہ نمونہ میں بعض امراض موجود ہیں جیسے کاربوہائیڈریٹ، پیپٹائڈسڈ، فینولس، وغیرہ، اور صاف نکلیک ایسڈ کا تناسب A 260 / A 230 2.0 سے زائد ہے. ایک 320 حل اور دیگر مداخلت کے عوامل کی خرابی کا پتہ لگاتا ہے. خالص نمونے کے لئے، ایک 320 عام طور پر 0 ہے.
ہانگجو سمر آلے کمپنی، لمیٹڈ
شامل کریں: نمبر .168 ووچنگ ایو، یوہوگ ڈسٹرکٹ، ہانگجو 310023، چین
ٹیلی فون: + 86-571-88739859
فون: +8618658504900
ای میل: info@sumerlab.com
ویب: sumerinstrument.com